除了臺盼藍染色法,以下這些方法也可以檢測細胞活性
更新時間:2025-05-13 點擊次數(shù):53
除了臺盼藍染色法,以下這些方法也可以檢測細胞活性:
MTT 比色法
CCK - 8 法
原理:與 MTT 法類似,細胞內的脫氫酶可以將 CCK - 8 試劑中的 WST - 8 還原成水溶性的橙黃色甲臜?;罴毎麛?shù)量與甲臜生成量成正比,通過檢測吸光度來衡量細胞活性。
操作:將細胞接種于培養(yǎng)板,加入 CCK - 8 溶液,孵育后直接用酶標儀測定吸光度。
應用:廣泛應用于細胞活性檢測、細胞增殖分析、藥物篩選等領域。該方法操作簡便,靈敏度高,且無需裂解細胞。
熒光染色法
原理:利用一些熒光染料對活細胞和死細胞進行特異性染色。例如,Calcein - AM 可被活細胞內的酯酶水解,產生綠色熒光,而死細胞由于酯酶活性喪失,不能產生熒光;碘化丙啶(PI)只能進入死細胞,與 DNA 結合后發(fā)出紅色熒光。通過熒光顯微鏡或流式細胞儀可對細胞進行觀察和分析。
操作:將細胞與熒光染料孵育,然后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。
應用:可用于區(qū)分活細胞和死細胞,以及對細胞進行定量分析,常用于細胞凋亡、細胞周期等研究。
ATP 檢測法
原理:ATP 是細胞內的能量貨幣,活細胞中含有大量 ATP,而死細胞中的 ATP 會迅速降解。通過檢測細胞內 ATP 的含量,可反映細胞的活性。
操作:使用熒光素 - 熒光素酶試劑盒,該試劑盒中的熒光素在熒光素酶和 ATP 的作用下會發(fā)出熒光,熒光強度與 ATP 含量成正比。將細胞裂解后加入試劑盒試劑,用熒光檢測儀測定熒光強度。
應用:常用于細胞活性檢測、細胞增殖分析以及藥物對細胞代謝的影響等研究。